Микроскопическое исследование
Выявленные при осмотре мокроты слизистые, гнойные, кровянистые участки или чем- либо отличающиеся по плотности, цвету кусочки выделяются препаровальной иглой или металлическим шпателем, переносятся на предметное стекло.
Из них приготавливают нативный препарат, обязательно с покровным стеклом. Правильно приготовленный препарат не содержит пузырьков воздуха, материал не выходит за пределы покровного стекла. В нативном препарате при микроскопии можно обнаружить спирали Куршмана, эластические волокна, частички гриба или мицелия.Дополнительную информацию получают при цитологическом исследовании фиксированных окрашенных препаратов мокроты. Для этого выбранные частицы биоматериала переносят на предметные стекла и размазывают круговыми движениями. Из каждой порции мокроты готовят 5-10 препаратов. После высыхания на воздухе мазки фиксируют метиловым спиртом в течение 10 мин. Полученный мазок окрашивают по Граму.
При микроскопии нативного препарата можно выделить три группы элементов:
1) клеточные;
2) волокнистые;
3) кристаллические образования.
Клеточные элементы мокроты
При количественном анализе учитываются следующие типы клеток: эпителиальные (реснитчатые, бокаловидные, промежуточные, базальные, дистрофически измененные клетки мерцательного эпителия), альвеолярные макрофаги, нейтрофильные, базофильные и эозинофильные лейкоциты, моноциты, тучные клетки.
Клетки цилиндрического мерцательного эпителия имеют правильную призматическую форму и овальное ядро, расположенное в средней части клетки. Каждая клетка несет на свободной поверхности короткие микроворсинки и около 200 мерцательных ресничек. Большое количество клеток цилиндрического мерцательного эпителия обнаруживается при бронхитах, трахеитах, бронхиальной астме, злокачественных новообразованиях легких.
Бокаловидные клетки выделяют слизистый секрет. Вместе с клетками цилиндрического мерцательного эпителия осуществляют мукоцилиарный клиренс.
Базальные и промежуточные клетки расположены в глубине эпителиального пласта и не достигают свободной поверхности бронхов. За счет них осуществляется регенерация. Альвеолярные макрофаги круглой и овальной формы, диаметром 10-30 мкм. Ядро имеет бобовидную, округлую или дискообразную форму и небольшие размеры относительно цитоплазмы. В одной клетке может содержаться два и более ядер. Цитоплазма пенистая, бледноголубого или розового цвета. Эти клетки при обильных включениях могут превращаться в коричневые или черные шары без видимых ядер. Их можно обнаружить при воспалительных процессах. Альвеолярные макрофаги, содержащие включения гемосидерина, называются сидерофагами или «клетками сердечных пороков»: выявляются при инфаркте легкого, кровоизлиянии, застое в малом круге кровообращения с помощью реакции на берлинскую лазурь на предметном стекле.Гемосидерин
Гемосидерин, лежащий внутриклеточно, окрашивается в голубой или сине-зеленый цвет. Преобладание нейтрофильных лейкоцитов указывает на острую гнойную инфекцию. Лимфоциты чаще встречаются при туберкулезе. Высокое содержание эозинофильных лейкоцитов в бронхиальном секрете нередко наблюдается при синдроме Леффлера, эозинофильном инфильтрате, микозе легких, астме. Моноциты чаще обнаруживаются при вирусных инфекциях. Иногда при продуктивном воспалении, наиболее характерном для туберкулеза легких, в мокроте могут быть обнаружены гигантские клетки Пирогова - Ланганса диаметром до 60 мкм с 5-15 ядрами, расположенными по периферии.
Эпителий бронхов под влиянием различных патологических процессов может подвергаться гиперплазии, дисплазии, метаплазии. Гиперплазия характеризуется увеличением числа и объема клеток, укрупнением их ядра. Ядерно-цитоплазматическое соотношение при этом не нарушено. Появление признаков атипии в гиперплазированных клетках эпителия бронхов расценивается как дисплазия. Различают три степени дисплазии (слабую, умеренную, выраженную). Слабая дисплазия характеризуется дегенеративными изменениями цитоплазмы клеток (вакуолизация, жировая дистрофия). Умеренная дисплазия эпителия характеризуется появлением в мокроте отдельных крупных клеток с крупными ядрами и ядрышками.
Выраженная дисплазия эпителия характеризуется вариабельностью числа клеток, ядер и ядерно-цитоплазматического соотношения.Плоскоклеточная метаплазия эпителия бронхов
Различают большие метаплазированные клетки и малые (Pap-клетки). При полной плоскоклеточной метаплазии цитоплазма эпителиальных клеток подвергается ороговению. Малые метаплазированные клетки по размеру несколько больше лейкоцитов. Различают три степени (слабую, умеренную и выраженную) плоскоклеточной метаплазии. При слабой и умеренной метаплазии реснитчатые клетки теряют свою обычную цилиндрическую форму, увеличиваются ядра, появляется вариабельность их размеров и гиперхромия. При выраженной степени плоскоклеточной метаплазии эпителия бронхов в метаплазированных клетках обнаруживаются признаки атипии ядер.
Обнаружение в мокроте клеток злокачественных опухолей при микроскопическом исследовании
Признаки злокачественности клеток - полиморфизм их размеров, нарушение ядерно-цитоплазматического соотношения в сторону увеличения ядра, изменение формы ядра, наличие в нем ядрышек неправильной формы, митоз клеток. Проводить цитологическое исследование при подозрении на опухоль и давать заключение должен специалист-цитолог.
Волокнистые образования
Эластические волокна - соединительнотканные элементы, появляющиеся при деструкции легочной ткани (туберкулез, абсцесс, новообразования), представляют собой длинные, блестящие, часто извитые тонкие нити, собирающиеся в пучки и преломляющие свет.
В старых туберкулезных кавернах эластические волокна покрываются мылами, и из них образуются так называемые коралловидные волокна (волокна Коппена - Джонса). Они неблестящие, толще обычных эластических волокон, грубые, ветвящиеся, бугристые. При действии на них 10 %-ного раствора NaOH мыла удаляются и обнажаются обычные эластические волокна. Для выявления эластических волокон используется специфическая окраска резорцин-фуксином Вейгерта.
Обызвествленные эластические волокна можно обнаружить при распаде туберкулезного петрификата.
Выглядят они как грубые, пропитанные солями извести палочковидные образования. Их фрагменты имеют вид пунктирной линии, состоящей из сероватых, преломляющих свет палочек. Фибриновые волокна похожи на сетевидно расположенные плоские волоконца, лежащие параллельно. Они растворяются при добавлении хлороформа и становятся тоньше и светлее при добавлении к препарату 30 %-ного раствора уксусной кислоты. Спирали Куршмана состоят из слизи и имеют более плотную осевую нить(центральная плотно закрученная часть) и рыхлую наружную мантию.
Кристаллические образования
Кристаллы Шарко - Лейдена встречаются вместе с эозинофилами и имеют вид вытянутых, блестящих, гладких, бесцветных различной величины ромбов, иногда с тупо обрезанными концами. Кристаллы Шарко - Лейдена образуются из белковых продуктов деградирующих эозинофильных лейкоцитов. Свежевыделенная мокрота их не содержит. Они образуются после нахождения в замкнутой посуде в течение 24-48 ч и встречаются при бронхиальной астме, эозинофильном инфильтрате, глистных инвазиях.
Кристаллы гематоидина имеют форму ромбов, иголок, пучков, звезд от золотистожелтого до коричнево-оранжевого цвета, что придает мокроте шоколадный цвет. Они образуются в глубине гематом, а также при некрозе тканей. Кристаллы холестерина имеют вид бесцветных, прямоугольной или ромбической формы фигур со ступенчатым углом, нередко накладывающихся друг на друга. Они образуются при распаде жира и жироперерожденных клеток при застое мокроты в полостях (туберкулез, абсцесс легкого, бронхоэктатическая болезнь, эхинококкоз, новообразования).
В гнойной мокроте часто можно выявить кристаллы жирных кислот в виде тонких игл и капель жира.
Еще по теме Микроскопическое исследование:
- 40.ИНСТРУМЕНТАЛЬНЫЕ И ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СИСТЕМЫ МОЧЕОТДЕЛЕНИЯ. ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.
- Общие и специальные методы клинического исследования
- Химическое исследование мочи, выпотных жидкостей (экссудатов и транссудатов), кала
- Методы выявления и исследования простейших
- МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
- Микроскопическое исследование на бледную трепонему
- Методологическое исследование
- Взятие материала для исследования
- ВВЕДЕНИЕ В КУРС ПАТОЛОГИЧЕСКОЙ АНАТОМИИ. ЭТАПЫ РАЗВИТИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКОЙ АНАТОМИИ. СОДЕРЖАНИЕ, ЗАДАЧИ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Особенности патологоанатомического исследования и оформления документации
- Правила исследования биопсийного, операционного и цитологического материала
- Методы исследования сосудисто-тромбоцитарного гемостаза