Доставка материала в клинико-диагностическую лабораторию для иммунологических и микробиологических исследований

Правила подготовки обследуемых, взятия и условия хранения и доставки материала для проведения исследований в КДЛ

Иммунологические исследования

Для исследования иммунной системы организма используют венозную кровь (плазму, сыворотку, форменные элементы: эритроциты, лейкоциты, лимфоциты), капиллярную кровь, а также биологические жидкости: мочу, слюну, желчь, молоко и т.

Венозную кровь забирает медсестра, капиллярную кровь - лаборант или врач (определение группы крови, резус-фактора).

Кровь у обследуемых берут утром, натощак, путем пункции локтевой вены сухой острой короткой иглой с широким просветом в чистую сунуто пробирку в количестве 5-6 мл. У новорожденных можно брать пуповинную кровь. У грудных детей кровь обычно берут из лобной, височной или яремной вены.

Если для исследований используют плазму или форменные элементы крови, кровь забирают в мерные пробирки или пробирки, имеющие метку, до которой должна быть набрана кровь. В пробирки предварительно вносят антикоагулянт.

Для забора крови желательно использовать пластиковую посуду. Стеклянные пробирки часто несут на поверхности следы детергентов, а также обладают способностью обмениваться ионами с кровью.

Удобно использовать коммерческие вакуумные пробирки, заполненные точным объемом и определенной, соответствующей концентрацией необходимого в конкретном случае антикоагулянта.

Наиболее часто используют трикалиевую или динатриевую соли ЭДТА, тринатрий цитрат и гепарин.

Несоответствие концентрации антикоагулянта объему взятой крови, недостаточно тщательное смешивание могут привести к значительным ошибкам (табл. 18).

Плазму для определения иммуноглобулинов можно получить из капиллярной крови, взятой с помощью туберкулинового шприца из безымянного или указательного пальца.

Полученная кровь должна быть своевременно доставлена в лабораторию. От забора до анализа кровь может стоять при комнатной температуре 2 ч, сыворотка - 48 ч в холодильнике. Полученный материал не рекомендуется хранить более 12 ч при комнатной температуре и более 1 суток в холодильнике (температура 4-8 °С). Наступающий гемолиз может повлиять на результаты анализа. Лучше всего сразу после взятия крови отобрать из нее сыворотку или плазму. Плазму можно хранить при -20 °С более длительное время.

Осадок используют для приготовления клеточной суспензии. Для этого к осадку, полученному из 0,5 мл крови, добавляют 1 мл 1 %-ного раствора желатина, приготовленного на среде 199. Ставят в термостат при 37 °С на 30 мин. Отбирают в центрифужную пробирку надосадочный слой, состоящий из клеток белой крови. К надосадочной жидкости добавляют 2-3 мл среды 199. Тщательно перемешивают. Центрифугируют при 1 тыс. оборотов в минуту 10 мин. Надосадочную жидкость сливают. К осадку добавляют 0,5 мл среды 199 и с помощью интенсивного 3-4-кратного пипетирования размешивают. Лейкоцитарная взвесь готова к употреблению.

Для определения групп крови по системе АВО используют капиллярную и венозную кровь. Взятие капиллярной крови проводит лаборант непосредственно перед определением. 0,05 мл крови сухой стеклянной палочкой наносят рядом с каждой каплей стандартной сыворотки.

Кровь можно брать из вены, пальца или из мочки уха. Исследуемую кровь берут в сухую несиликонированную пробирку. Для отделения сыворотки кровь центрифугируют и оставляют стоять на 20-30 мин. Из пробирки, содержащей исследуемую кровь, пипеткой извлекают сыворотку.

Температура в помещении, где проводится исследование, должна быть 15-25 °С (при температуре воздуха выше 25 °С агглютинация может быть не замечена, ниже 15 °С - может появиться неспецифическая агглютинация).

Для определения резус-фактора исследуют эритроциты крови.

Кровь из вены берут в сухую пробирку в количестве 3 мл. После свертывания крови отделяют сыворотку от сгустка. Эритроциты отмывают от остатков сыворотки изотоническим раствором хлористого натрия. Для этого пробирку с кровью на 3/4 заполняют изотоническим раствором, содержимое перемешивают и центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают из отмытых эритроцитов, готовят 2 %-ную взвесь. В промаркированных пробирках смешивают 2,45 мл изотонического раствора и 0,05 мл осадка отмытых эритроцитов.

Кровь стабильна при 4-8 °С в течение 2-3 суток.

Микробиологические исследования

Общими требованиями к процедуре отбора и транспортировки проб являются:

1) знание оптимальных сроков для взятия материала на исследование;

2) взятие материала с учетом места максимальной локализации возбудителя, путей выделения в окружающую среду;

3) отбор материала для исследования в необходимом и достаточном объеме с обеспечением условий, исключающих контаминацию проб;

4) по возможности - взятие материала до применения антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов или после отмены антибиотиков через 2-3 дня;

5) материалы, подлежащие бакобследованию, собирают в стерильную посуду, снабжают этикеткой с фамилией обследуемого и наименованием материала. В сопроводительном документе-направлении необходимо указать, какое отделение направляет материал, Ф.И.О. и возраст больного, предполагаемый диагноз, антибактериальную терапию, дату и час взятия пробы;

6) материал доставляется проинструктированным медработником в контейнерах, не допуская опрокидывания. При транспортировке не допускается смачивание ватных пробок и замораживание материала;

7) материал доставляется немедленно или в течение 1-2 ч. При невозможности доставки в указанные сроки биоматериал хранят в холодильнике, кроме крови и материала, исследуемого на наличие менингококка. При увеличении времени доставки проб до 48 ч необходимо использовать транспортные среды;

8) доставленные в лабораторию пробы должны быть размещены в специально отведенном месте для приема биоматериала. На работников лаборатории при приеме возлагается контроль за соблюдением правильной доставки образцов;

9) категорически запрещается доставка материала в лабораторию обследуемыми лицами;

10) в случае несоблюдения условий образцы не подлежат обработке, и об этом сообщается лечащему врачу для повторного проведения исследования.