Определение гормонов в биологических жидкостях

Обобщённые данные о месте синтеза, точках приложения и механизмах действия гормонов и биологически активных веществ, имеющие диагностическое значение в практике гинеколога-эндокринолога, приведены в таблице 2.

36 Эндокринная гинекология

Таблица 2

Гормоны эндокринных желез и тканевые гормоны (разработано на основании данных Ефимова А.С.

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 37

Таблица 2 (продолжение)

38 Эндокринная гинекология

Таблица 2 (окончание)

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 39

Учитывая колебания секреции гонадотропных и яичниковых гормонов в различные фазы менструального цикла (МЦ), целесообразно исследование содержания гормонов в биологических жидкостях в динамике. При сохраненном МЦ желательно проводить исследования не менее трех раз в цикле: в раннюю фолликулиновую, в позднюю фолликулиновую (овуляция) и лютеино-вую фазы.

Общие правила для определения гормонов в крови заключаются в правильном взятии крови, исключающем гемолиз; немедленном отделении плазмы от форменных элементов и замораживании образцов (если это необходимо) при температуре не выше -20°С.

Учитывая наличие биоритмов в секреции гормонов, рекомендуется периферическую венозную кровь у женщин брать в одно и то же время, лучше утром натощак.

Так как параллельные определения гонадотропных и стероидных гормонов в плазме и сыворотке крови дают достаточно близкие значения, допустимо проведение исследований в обеих средах, но все же предпочтительнее пользоваться сывороткой крови, так как из нее легче экстрагируются гормоны, кроме того, в плазме при замораживании и оттаивании могут появляться хлопья фибрина, затрудняющие исследования.

Определяя концентрацию гормонов в крови, следует учитывать, что она зависит от скорости секреции гормонов, связывания их с белками плазмы и величины метаболического клиренса. Почти все гормоны находятся в крови в двух формах — свободной и связанной, причем только свободная фракция обладает биологической активностью. В то же время большинство методов предусматривает определение суммарной концентрации обеих форм гормона. Необходимо также считаться с "сиюминутностью" получаемых результатов определения гормонов в крови: как в норме, так и при патологии всегда возможны внезапные резкие колебания в секреции гомонов, что отражается на показателях их содержания в крови.

Известную сложность представляют и различные ритмы секреции гормонов: так, если стероидные гормоны выделяются в циркадном ритме, то гона-дотропные — в пульсирующем, с максимумом каждые 90 минут.

Так как на результаты определения экскреции гормонов могут оказывать влияние различные вещества как гормональной, так и негормональной природы, выделяющиеся через почки, из рациона обследуемых следует исключить продукты и лекарственные препараты, являющиеся источником пигментов. Резко сниженные цифры экскреции эстрогенов бывают при приёме кортико-стероидных препаратов, слабительных, а также при наличии сахара в моче.

Следует также учитывать значительные индивидуальные колебания в содержании гормонов, в результате чего возможны существенные отклонения полученного результата от средних показателей у здоровых женщин, что, однако, является нормой для данной пациентки.

40 Эндокринная гинекология

показателей играет используемый в каждом конкретном случае метод определения того или иного гормона. При использовании коммерческих наборов KIT (радиоиммунологический или иммуноферментный методы) в инструкциях к наборам указываются средние количества того или иного гормона, которые содержатся в крови здоровых людей. Однако некоторые лаборатории, исходя из этических соображений, не указывают в результатах показатели нормы, в связи с чем для клиницистов важно иметь сводную таблицу нормальных показателей, а также коэффициент пересчета различных единиц для тех случаев, когда нужно оценить динамику показателей, а пациентка обследовалась в различных лабораториях (табл. 3).

Таблица 3

Нормальные уровни основных гормонов и некоторых биохимических показателей в сыворотке крови у женщин (Yen S.S.C. et al., 1999)

Учитывая колебания содержания в крови гормонов гипофиза и яичников у

женщин репродуктивного возраста с нормальным МЦ в зависимости от фазы

менструального цикла, мы считаем целесообразным представить также

ориентировочные нормативы в различные дни цикла (табл. 4).

Таблица 4

Содержание эстрадиола (пмоль/л), прогестерона (нмоль/л), тестостерона (нмоль/л), ФСГ и ЛГ (мМЕ/л) и пролактина (мкМЕ/мл) в крови женщин в динамике МЦ (п=136)*

Современные методы обследования больных женщин с нарушениями репродуктивной функции основываются не только на определении содержания тех или иных гормонов в крови, но и на исследовании их экскреции.

Таблица 5 Содержание эстрогенов (нмоль/сут), прегнандиола (мкмоль/сут) и 17-кетостероидов (мкмоль/сут) в моче во время МЦ (п=244)

Однако определение содержания гормонов в сыворотке крови само по себе далеко не всегда обеспечивает адекватную оценку функционального состояния эндокринной системы, ибо при этом не учитывается содержание секс-стероидсвязывающих глобулинов и альбуминов и, соответственно, удельный вес гормонов, находящихся в свободном и связанном состоянии, а также состояние рецепторного звена репродуктивной системы, т.е. способность органов-мишеней воспринимать те или иные содержания гормонов.

В этом свете не теряет своей актуальности применение тестов функциональной диагностики, отражающих суммарный эффект — гормональную насыщенность организма и реакцию органов-мишеней на имеющиеся содержания гормонов.

Эти тесты основаны на учете воздействия гормонов яичника на органы-мишени. Так как во время МЦ изменяется секреция эстрогенов и прогестерона, специфический "ответ" тканей гормонально-зависимых органов представляет собой реакцию на суммарное воздействие этих гормонов.

42 Эндокринная гинекология

В диагностических целях рекомендуется изучение следующих тестов:

1) цитологическое исследование влагалищных мазков;

2) изучение свойств цервикальной слизи (количество, кристаллизация ("феномен папоротника"), физико-химические ее свойства ("феномен зрачка") и тягучесть);

3) измерение базальной температуры.

Невозможно переоценить диагностическую ценность в практике гинеколога-эндокринолога ультразвукового исследования (УЗИ) матки и яичников, а также оценки гистологического исследования соскоба эндометрия.

Цитологическое исследование влагалищных мазков (кольпоцитология).

Метод основан на изучении циклических изменений эпителия влагалища во время МЦ (влагалищные циклы).

Стенка влагалища состоит из стромы и функционального слоя; последний содержит три слоя клеток слизистой: поверхностный, промежуточный и пара-базальный.

Соответственно трем слоям влагалищного эпителия в мазках, взятых с передне-боковой стенки влагалища, различают три вида клеток: поверхностные, происходящие из внешнего слоя, промежуточные — из среднего слоя и параба-зальные — из внутреннего слоя эпителия.

Степень созревания влагалищного эпителия регулируется гормонами яичника. При низкой продукции половых гормонов влагалищный эпителий теряет свою многослойность и состоит из нескольких рядов парабазальных клеток (в норме — у детей до 4-6 лет и у женщин в менопаузе). При умеренной гормональной стимуляции разрастается промежуточный слой эпителия, при максимальной эстрогенной насыщенности, соответствующей овуляции, отчетливо различаются все три слоя эпителия слизистой влагалища и утолщается поверхностный слой, клетки которого начинают отторгаться. После образования и функционирования желтого тела происходит разрастание и отторжение клеток промежуточного слоя, а во время менструации вместе с отторжением функционального слоя эндометрия происходит и отторжение клеток влагалищного эпителия, относящегося к промежуточным и, отчасти, параба-зальным слоям.

Таким образом, влагалищные мазки имеют следующий клеточный состав:

• поверхностные клетки — полигональные, диаметром до 60 мкм, иногда с пикнотичным (бесструктурным) ядром, диаметр последнего превышает 6 мкм. Появляются в мазках при максимальной толщине эпителия;

• промежуточные клетки — овальной или вытянутой, веретенообразной формы, диаметром в пределах 25-30 мкм, с везикулярным ядром (диаметром меньше 6 мкм);

• парабазальные клетки — самые мелкие, диаметром в пределах 15-20 мкм, с крупным ядром, в котором виден четкий хроматиновый рисунок.

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 43

Оценка гормонального воздействия производится после микроскопического исследования мазка сначала при малом увеличении (10x10), что дает возможность определить расположение клеток, а затем — при большом (10x20 или 10x40), при котором оцениваются морфологические особенности клеток.

Для интерпретации кольпоцитограмм выводятся индексы созревания, ка-риопикноза и эозинофилии.

Индекс созревания (ИС, числовой индекс) представляет собой процентное соотношение поверхностных, промежуточных и парабазальных клеток. Он записывается в виде трех чисел, из которых первое — процент парабазальных, второе — промежуточных и третье — поверхностных клеток.

Кариопикнотический индекс (КИ) — процентное соотношение поверхностных клеток с пикнотичными ядрами к клеткам, имеющим везикулярные ядра. Этот индекс характеризует эстрогенную насыщенность организма, так как только эстрогенные гормоны вызывают пролиферативные изменения слизистой оболочки влагалища, приводящие к конденсации хроматиновой структуры ядра эпителиальных клеток.

Эозинофильный индекс (ЭИ) — процентное отношение поверхностных клеток с эозинофильно окрашенной цитоплазмой к клеткам с базофильной цитоплазмой (может быть вычислен только при полихромном методе окрашивания) и также характеризует исключительно эстрогенное воздействие на эпителий влагалища.

В норме показатели индексов кариопикноза и эозинофилии совпадают с кривыми содержания эстрогенов в крови, резко возрастая в период овуляции.

Прогестероновая стимуляция оценивается по трехбалльной системе в зависимости от количества скрученных клеток: 3 балла (+++) — большое количество, превышающее 50%; 2 балла (++) — умеренное, в пределах 20-40%, 1 балл (+) — незначительное, меньше 15%; 0 баллов (-) — скрученные клетки не обнаруживаются.

Так же (в баллах) обозначается скученность клеток (количество клеток, образующих скопления по 5 и более).

Цитологическая картина мазков при гормональных расстройствах.

• Анэстрогенный тип мазка (атрофический). Обнаруживаются клетки глубоких слоев влагалища — базальные, парабазальные. В мазках встречается обычно много лейкоцитов, так как в связи с отсутствием эстрогенов снижается реактивность слизистой влагалища. За счет ранимости слизистой влагалища обнаруживаются и эритроциты. Физиологически такие мазки характерны для препубертатного периода и для поздней постменопаузы.

• Гипоэстрогенный тип мазка. Нет стабильной кольпоцитологической картины. В зависимости от степени снижения эстрогенной насыщенности мазки могут состоять из различного количества поверхностных, промежуточных, базально-парабазальных клеток. Критерием для гипоэстрогенного типа

44 Эндокринная гинекология

мазка является то, что в процессе динамического обследования женщины эо-зинофильный индекс не превышает 15%, кариопикнотический — 50%. Чем ниже уровень эстрогенов, тем меньше в мазках поверхностных клеток, увеличивается число клеток глубоко лежащих слоев слизистой влагалища.

В зависимости от данных морфологии клеток различают 4 степени эстро-генной стимуляции по Шмитту (Schmitt).

I степень — влагалищный мазок состоит исключительно из базальных клеток;

II степень — только из парабазальных клеток;

III степень — из промежуточных клеток;

IV степень — из поверхностных клеток.

По этой схеме легко обозначаются отдельные переходные и промежуточные состояния. Например, если в кольпоцитологическом заключении указывается И-Ш степень эстрогенной насыщенности, то мазок состоит из парабазальных и промежуточных клеток, с преобладанием парабазальных.

Гипоэстрогения может быть циклической и ациклической, что можно выявить на основании динамического исследования мазков. При этом циклическая гипоэстрогения сопровождается определенными колебаниями ЭИ и КПИ. Следовательно, несмотря на снижение уровня эстрогенов, ритм изменения клеток даже в ответ на небольшие циклические колебания гормонов сохранен.

При ациклической гипоэстрогении указанных колебаний показателей не наблюдается.

• Гиперэстрогенный тип мазка. Мазок состоит исключительно из плос ких поверхностных клеток, с резким истончением цитоплазмы, вакуолизаци ей и складчатостью ее. Некоторые клетки могут быть фрагментированы, вследствие чего наблюдаются обрывки клеток, голые ядра. Почти во всех клетках ядра пикнотические, ЭИ составляет 70-80%, КПИ — до 100%.

Описанный выше мазок иногда называют чистым гиперэстрогенным. При сохранении двухфазного цикла на фоне гиперэстрогении во II фазе цикла может наблюдаться смешанный гиперэстрогенный тип мазка. Особенностью этого мазка является то, что во время прогестероновой фазы, наряду с признаками выраженного прогестеронного действия (сгруппированность и складчатость клеток, появление лейкоцитов), отмечаются признаки повышенной эстрогенной активности: ЭИ и КПИ сохраняют высокие величины, как и в I фазе.

• Гиполютеиновый тип мазка. Следует указать, что нет так называемых "алютеиновых" типов мазков. Даже если не происходит овуляция и не обра зуется желтое тело (т.е. при ановуляторных циклах) выявляются мазки с раз личной степенью эстрогенной и прогестероновой стимуляции.

При гиполютеинизме, который может наблюдаться во II фазе цикла, наряду с признаками прогестероновой стимуляции (складчатость, скрученность и сгруппирование клеток, появление лейкоцитов), сохраняется высокий КПИ при снижении ЭИ. Кроме того, может укорачиваться прогестероновая фаза

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 45

цикла. В связи со скудными цитологическими данными, характеризующими недостаточность желтого тела, для диагностики этого состояния важное значение имеют данные ректальной температуры и определения прогестерона в сыворотке крови в эту фазу.

• Гиперлютеиновый тип мазка напоминает мазки при беременности: клетки расположены группами, складчатые, удлиненные, напоминают ладьи, поэтому их называют ладьевидными клетками. Нередко наблюдается большое количество палочек Додерлейна, что приводит к цитолизу. ЭИ составляет 30%, КПИ — 40%.

• Андрогенный тип мазка. Выделяют мазки "чистого" андрогенного типа и комбинированного (или смешанного) андрогенного воздействия.

При чистом андрогенном воздействии (атрофический андрогенный тип мазка) встречаются, главным образом, базальные и парабазальные клетки. В отличие от обычных клеток, они несколько крупнее, протоплазма их окрашивается бледно, как бы "вымытая", часто содержит одну или несколько вакуолей, которые достигают иногда значительных размеров. Клеточные ядра пузырьковидные, светлые, бедные хроматином, хроматиновая субстанция располагается неравномерно. Обнаруживаются также клетки с двумя ядрами. Лейкоциты в мазках отсутствуют или число их значительно уменьшено. Мазки чистые, имеют вид промытых водой. Подобные мазки чистого андрогенного воздействия при гинекологической патологии не наблюдаются.

При смешанном андрогенно-эстрогенном воздействии (андрогенный про-лиферативный тип мазка) характер мазков зависит от соотношения эстрогенов и андрогенов, так как андрогены оказывают определенное антиэстроген-ное воздействие на эпителий. Под влиянием андрогенов снижаются ЭИ и КПИ, уменьшаются клетки поверхностных слоев, увеличиваются клетки глубоких слоев влагалищного эпителия (парабазальные и промежуточные). Клетки промежуточного типа становятся складчатыми, загнутыми, появляются клетки навикулярного типа. Расположение клеток изолированное, мазок выглядит чистым. Цитоплазма клеток равномерно бледная, встречаются вакуоли. Хроматиновая сеть неясная, расположение хроматина неравномерное. Усиление андрогенного воздействия приводит к пролиферации клеток промежуточного слоя, богатых гликогеном. Вследствие усиленного выделения молочной кислоты пролиферирующими влагалищными эпителиальными клетками развивается большое количество палочек Дедерлейна, которые вызывают сильный цитолиз. От мазков прогестеронового типа такие мазки отличаются незначительной десквамацией эпителия и чистотой мазка. Большие дозы прогестерона способны также вызывать препикноз ядер промежуточных клеток, чего не наблюдается при андрогенном воздействии.

• Смешанный андрогенно-прогестероновый тип мазка наблюдается довольно редко. Андрогены усиливают влияние прогестерона. При слабом и умеренном андрогенном воздействии мазки прогестеронового вида остаются неизмененными. При усилении андрогенного влияния проявляются характер-

46 Эндокринная гинекология

ные цитологические признаки: чистая, бледно окрашенная цитоплазма, бледное, пузырьковидное ядро с сетчатой структурой хроматина. Неизмененными остаются лейкоцитоз и цитолиз.

Базальная температура.

Базальная (ректальная) температура также является одним из тестов функциональной диагностики яичников. Тест основан на гипертермическом влиянии прогестерона на терморегулирующий центр гипоталамуса.

Нормальная ректальная температура имеет две хорошо различимые фазы: фазу относительной гипотермии (ниже 37° в пределах 36,3-36,8°) после менструации и фазу относительной гипертермии (37-37,4°) во II половине менструального цикла, что соответствует функции желтого тела (влиянию прогестерона). Разница между гипотермической и гипертермической температурами в норме составляет 0,4-0,6°. Резкое снижение температуры к концу I фазы соответствует самому высокому уровню выделения эстрогенов в организме женщины, и считают, что это связано с процессом овуляции. Овуляторный процесс является соединяющим звеном между гипотермической и гипертермической фазами базальной температуры. За 1-2 дня до наступления менструации базальная температура обычно падает.

Различают 5 типов кривых базальной температуры:

• Первый тип температурной кривой — с хорошо выраженным повышением температуры во II половине цикла, во многих случаях с заметным "овуляторным" падением температуры и снижением ее перед менструацией. Такая кривая характерна для нормального двухфазного цикла.

• Второй тип — со слабо выраженным повышением температуры (до 0,3°) во II половине цикла. Такая кривая также встречается чаще при двухфазном цикле. Иногда она может указывать на недостаточность функции желтого тела.

• Третий тип — с повышением температуры незадолго до начала менструации и без снижения ее перед менструацией. Такая кривая характерна для двухфазного цикла с укорочением и недостаточностью лютеиновой фазы.

• Четвертый тип — "монотонная гипотермическая" температурная кривая, характерная для ановуляторного цикла. Иногда может наблюдаться и при других нарушениях менструального цикла.

• Пятый тип — атипичная температурная кривая, с большими размахами температуры, без заметного подъема во II фазу цикла.

Симптом кристаллизации шеечной слизи (симптом "папоротника").

Феномен папоротника обусловливается кристаллизацией солей цервикальной слизи. Феномен подвергается изменениям в зависимости от фазы цикла. Степень выраженности этого феномена прямо пропорциональна эстрогенной активности.

С 1-го по 5-6-й день двухфазного менструального цикла слизь имеет аморфный вид, кристаллизация отсутствует.

На 7-8-й день цикла появляются слабые следы кристаллизации.

С 9-го дня цикла степень выраженности кристаллизации постепенно усиливается, достигая максимума к моменту овуляции.

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 47

После овуляции начинается разрушение листа папоротника на отдельные "фрагменты" и в период расцвета желтого тела (на 21-й день) он приобретает аморфный вид.

Техника получения цервикальной слизи: после предварительного удаления ватным тампоном влагалищного содержимого из цервикального канала пинцетом производится забор слизи на предметное стекло, высушивается на воздухе и исследуется под микроскопом.

Степень выраженности симптома папоротника определяется показателями:

(-) — кристаллизация отсутствует, слизь аморфная;

(+) — кристаллизация со смазанным нечетким рисунком в виде отдельных стеблей и игл кристаллов;

(++) — четко выраженная структура листа папоротника с тонким и ясным рисунком;

(+++) — крупные кристаллы, массивные стебли, ветви расходятся под углом 90°.

Симптом "зрачка".

В течение менструального цикла под действием половых гормонов происходят изменения шейки матки и цервикальной слизи. Эстрогены стимулируют секрецию цервикальной слизи, а прогестерон угнетает и вызывает сгущение слизи. Эти изменения могут служить в качестве ориентировочного теста функциональной деятельности яичников.

На 8-9-й день двухфазного менструального цикла наружное отверстие цервикального канала начинает расширяться, в нем появляется стекловидная прозрачная слизь. Расширение достигает максимума (в диаметре 0,25-0,3 см) к моменту овуляции. Форма зева в это время бывает овальная или округлая и напоминает зрачок, откуда и произошло наименование симптом "зрачка".

На 15-16-Й день цикла просвет цервикального канала начинает сужаться, а на 20-21-й день — закрывается.

Степень выраженности феномена зрачка обозначают следующим образом:

(+) — раскрытие цервикального канала в виде узкой полоски или точки, выполненной прозрачной стекловидной слизью;

(++) — раскрытие цервикального канала до 0,2 см в диаметре;

(+++) — раскрытие цервикального канала до 0,3 см в диаметре, с обильным отделением прозрачной стекловидной слизи и по времени совпадает с овуляцией.

Сохранение симптома "зрачка" в течение всего менструального цикла следует трактовать как ановуляцию.

Функциональные тесты с гормонами при эндокринных нарушениях.

Важной задачей диагностики эндокринных нарушений является установление уровня патологического процесса нейроэндокринных расстройств менструальной функции. При этом следует отметить, что заболевания яичников, коры надпочечников и гипофиза часто имеют сходную клиническую картину. Функциональные тесты с гормонами, в том числе с половыми стероидными и гонадотропными, мо-

48 Эндокринная гинекология

гут служить достаточно надежным методом дифференциальной диагностики на этапе постановки диагноза и, в некоторых случаях, исключить необходимость бо лее сложных и трудоемких клинико-лабораторных исследований. -

Тесты с гормонами основаны на учете специфических реакций, вызываемых в организме, и по механизму действия их можно разделить на 3 группы: тесты на стимуляцию, на подавление и на избирательность действия гормона, основанные на учете воздействия гормонов яичника на органы-мишени.

Тесты на стимуляцию.

1. Прогестероновая проба.

Цель. Для дифференциальной диагностики маточной и яичниковой форм аменореи и для выяснения эстрогенной активности яичников. Проба основана на способности прогестерона вызывать секреторные изменения эндометрия с последующим менструальноподобным кровотечением в случае, если эндометрий достаточно подготовлен эстрогенами и имеет нормальную чувствительность к прогестерону.

Методика. Ежедневно в течение 6 дней микронизированный прогестерон 100-200 мг (утрожестан) или синтетические гестагены — 6 дней (дуфастон по 10-20 мг).

Положительная проба — появление менструальноподобного кровотечения через 2-3-4 дня после отмены препарата исключает маточный генез аменореи, свидетельствует о достаточной эстрогенной активности яичников и указывает на недостаточность желтого тела. Но эта проба не раскрывает причину: является ли абсолютная или относительная недостаточность следствием поражения самих яичников или же отсутствия стимуляции со стороны гипофиза.

Отрицательная проба может быть при эстрогенной недостаточности или при маточной форме аменореи. Эта проба по мере совершенствования диа гностической техники теряет свою значимость. Так, определяя при ультразву ковом исследовании состояние эндометрия, следует учитывать, что при атро- фичном эндометрии (толщина до 8 мм) проведение пробы нецелесообразно ибо она заведомо будет отрицательной.

2. Эстрогенная проба (самостоятельно редко применяется). Цель. Повысить рецептивность эндометрия.

< Методика. Применяют эстрогенные гормоны: чаще всего пероральные эстрогены — эстрадиола-валерат 2 мг (прогинова) или трансдермальный 17р-эстрадиол 1,5-2 мг (эстрожель, дивигель).

Положительная проба — появление кровянистых выделений не позже 8-10 дней после отмены препарата.

3. Эстрогенно-прогестероновая проба.

Цель. Для дифференциальной диагностики яичниковой и маточной форм аменореи.

-г Методика. Применяют эстрогенные гормоны (дозы и препараты см. выше), под контролем тестов функциональной диагностики, до появления феномена "зрачка", кристаллизации шеечной слизи и увеличения КПИ до

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 49

60-70%, но не менее 14 дней. Затем назначают прогестагены в указанных выше дозах в течение 6 дней.

Положительная проба — появление менструальной реакции указывает на отсутствие маточной формы аменореи, свидетельствует о первичной яичниковой или вторичной (гипоталамо-гипофизарной) недостаточности.

Отрицательная проба — отсутствие менструальной реакции указывает на маточную форму аменореи (туберкулезный эндометрит, атрофия эндометрия, внутриматочные синехии, пороки развития матки).

4. Проба с хорионическим гонадотропином.

Цель. Выяснить, является ли ановуляторный цикл первично-яичниковым или связан с недостаточностью ЛГ гипофиза. Проба основана на способности ХГ стимулировать активность функционально полноценных яичников, что приводит к усиленному образованию половых гормонов. Для исключения отрицательной реакции, связанной с недостаточностью ФСГ, эту пробу рекомендуется проводить при наличии достаточной эстрогенной активности яичников.

Методика. Применяют хорионический гонадотропин по 1000-2000 ед. внутримышечно ежедневно в течение 4-5 дней. При наличии ритмичных менструаций пробу начинают с 11 -12-го дня цикла, при аменорее или опсомено-рее — независимо от времени.

Результаты проверяются: по повышению базальной температуры на 0,4-0,7°, появлению "прогестеронового" типа влагалищного мазка, исчезновению феномена кристаллизации шеечной слизи, а также по появлению менст-руальноподобного кровотечения через 10-14 дней после отмены препарата.

Положительная проба указывает на недостаточность ЛГ гипофиза и нор мальную чувствительность к нему яичников. Появление кровотечения указы вает также на нормальное состояние эндометрия.

Отрицательная проба указывает на первичное поражение яичников.

5. Проба с фолликулостимулирующим гормоном.

Цель. Выяснить, имеется ли первичное или вторичное, вследствие отсутст вия гипофизарной стимуляции, поражение яичников.

Эта проба обычно проводится при аменореях на фоне выраженного сниже ния или отсутствия эстрогенной активности яичников, на что указывает атро- фический тип реакции влагалищного мазка и отсутствие феномена кристалли зации шеечной слизи.

Методика. Применяют сывороточный гонадотропин по 500-1000 ед. в течение 7 дней или пергонал-500 по 500-1000 ед. в течение 10 дней внутримы шечно ежедневно. H"tv

Результаты проверяют по увеличению КПИ до 60-70%, появлению феномена кристаллизации шеечной слизи, симптома "зрачка" и растяжению слизи до 12-15 см.

Положительная проба указывает на аменорею гипофизарного характера, т.е. на вторичную недостаточность яичников.

Отрицательная проба указывает на аменорею яичникового происхождения.

50 Эндокринная гинекология

Тесты на подавление.

1. Прогестероновая проба.

i Z/ель. Для выяснения генеза гиперандрогении. Суть пробы заключается в подавлении секреции ЛГ со вторичным понижением андрогенной активности яичников, так как секреция яичниковых андрогенов контролируется ЛГ.

Методика. Определяют исходную экскрецию 17-КС и назначают микро-низированный прогестерон по 200 мг или дидрогестерон (дуфастон по 20 мг).

Положительная проба — экскреция 17-КС уменьшается на 50% и более при яичниковом генезе гиперандрогении.

Отрицательная проба — незначительное снижение экскреции 17-КС при андрогении надпочечникового генеза.

2. Проба с комбинированными эстроген-гестагенными препаратами.

Цель. Для выяснения генеза гиперандрогении. Проба основана на их тормозящем влиянии на гонадотропную функцию и, соответственно, подавление функции яичников и, таким образом, уменьшение яичниковых андрогенов.

Методика. Определяют исходную экскрецию 17-КС и назначают один из комбинированных эстроген-гестагенных препаратов по 2 таблетки в день в течение 10 дней.

Положительная проба — уменьшается экскреция 17-КС на 50% и более при яичниковом генезе гиперандрогении.

Отрицательная проба — экскреция 17-КС не изменяется при надпочечни-ковом генезе гиперандрогении.

3. Проба с комбинированными эстроген-гестагенными и глюкокортико- идными препаратами.

Цель. Для выяснения генеза гиперандрогении. Комбинированные функциональные пробы сокращают время обследования.

Методика. Определяют исходную экскрецию 17-КС и назначают один из эстроген-гестагенных препаратов по 2 таблетки в течение 10 дней, затем одновременно преднизолон по 20 мг (в 4 приема) в течение 5 дней или дексаме-тазон по 2 мг (в 4 приема) в течение 2 дней.

При яичниковом генезе гиперандрогении после окончания приема эстро ген-гестагенных препаратов экскреция 17-КС снижается более чем на 50%, после совместного применения препаратов имеет место незначительное до полнительное снижение экскреции 17-КС.

При надпочечниковой форме гиперандрогении — незначительное снижение экскреции 17-КС после приема эстроген-гестагенных препаратов и выраженное снижение после совместного применения обоих препаратов.

При смешанной форме гиперандрогении (сочетанное поражение яичников и надпочечников) отмечается выраженное снижение экскреции 17-КС после приема эстроген-гестагенных препаратов с последующим дополнительным снижением их экскреции при приеме обоих препаратов.

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 51

Тесты на избирательность действия гормонов.

1. Проба с хорионическим гонадотропином (ХГ).

Цель. Для выяснения генеза гиперандрогении. Проба основана на непосредственной стимуляции функции яичников и, соответственно, увеличении продукции яичниковых андрогенов.

Методика. Определяют исходную экскрецию 17-КС и назначают ХГ по 1500-2000 ед. внутримышечно в течение 4-5 дней.

Положительная проба — увеличение экскреции 17-КС на 50% и более наблюдается при яичниковом генезе (гиперандрогении).

Отрицательная проба — отсутствие изменения экскреции андрогенов позволяет допустить надпочечниковое происхождение гиперандрогении.

2. Проба с эстроген-гестагенными препаратами и АКТГ. Цель. Для выяснения генеза гиперандрогении.

Методика. Определяют исходную экскрецию 17-КС и 17-ОКС и назначают в течение 10 дней один из монофазных эстроген-гестагенных препаратов по 2 таблетки, затем одновременно вводят по 25-40 ед. АКТГ в течение 3 дней.

При яичниковом генезе заболевания после приема эстроген-гестагенных препаратов экскреция 17-КС снижается на 50% и более, после добавления АКТГ экскреция 17-КС увеличивается в 2 раза, а 17-ОКС — в 3 раза.

При надпочечниковой гиперандрогении после приема эстроген-гестагенных препаратов экскреция 17-КС снижается незначительно и после добавления АКТГ резко возрастает при незначительном повышении экскреции 17-ОКС.

Метод ультразвуковой диагностики.

В связи с высокой информативностью и доступностью в повседневную клиническую практику гинекологов-эндокринологов прочно вошел метод ультразвуковой диагностики. Одним из важных достижений последнего десятилетия стало внедрение трансвагинального ультразвукового сканирования, применение которого значительно расширило возможности диагностики не только анатомических особенностей, но и дисгормональных состояний матки и придатков.

При сравнительном анализе трансабдоминальной и трансвагинальной эхографии очевидны существенные преимущества последней, обусловленные возможностью ее использования при ожирении, спаечном процессе, отсутствии необходимости наполнения мочевого пузыря, а также большей информативностью. Применение трансвагинальной эхографии позволяет не только более точно определять размеры анатомических образований, но и более тщательно исследовать их структуру (рис. 1).

52

Рисунок 1. Толщина эндометрия при трансабдоминальном и трансвагинальном исследовании , , . .

В норме при ультразвуковом исследовании матка имеет грушевидную форму, уплощенную в передне-заднем размере. Эхоплотность миометрия оценивается как низкая и не меняется в разные фазы МЦ. Размеры матки широко варьируют в зависимости от возраста и состояния репродуктивной системы. Для правильного определения длины, передне-заднего размера матки и толщины эндометрия используют продольное сечение матки, при котором отражение от эндометрия и слизистой цервикального канала должно визуализироваться на всем протяжении. В репродуктивном периоде размеры матки максимальны и составляют: длина — 3,6-5,9 см, передне-задний размер — 2,8-4,5 см, ширина — 4,6-6,2 см.

При исследовании матки обязательно оценивается состояние эндометрия (толщина, структура, соответствие фазе и дню менструального цикла). Наиболее информативно измерение толщины эндометрия (передне-задний размер М-эхо), максимальное значение которого к концу секреторной фазы составляет 13-15 мм. К моменту овуляции (поздней пролиферации) толщина эндометрия соответствует 8-9 мм. При исследовании эндометрия в постменопаузе необходимо применение только трансвагинальной эхографии, так как при незначительной толщине инволютивного эндометрия (до 5 мм) трансабдоминальное УЗИ является недостаточно информативным и не дает возможности оценить его структуру.

В качестве как скринингового, так и мониторингового метода оценки эндометрия хорошо зарекомендовало себя определение эндометриально-маточ-ного коэффициента (ЭМК) с использованием трансвагинального датчика. Этот коэффициент представляет собой отношение толщины эндометрия (ТЭ) к величине передне-заднего размера матки и дает возможность более объективно оценивать состояние эндометрия, особенно в постменопаузе, учитывая особенности инволютивных процессов в эндо- и миометрии (табл. 6).

У женщин репродуктивного возраста ЭМК в норме составляет 0,24±0,06, а при гиперпластических процессах — превышает 0,3.

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 53

Таблица 6

Эндометриально-маточный коэффициент у женщин в разные фазы климактерического периода (М±т)

Для изучения яичников используются продольное и поперечное сканирование полости малого таза. При этом измеряются максимальные размеры яичников (длина, ширина, толщина), определяется их объем (длина х ширина х толщина х 0,523), состояние стромы и фолликулярного аппарата (количество и размер фолликулов), а также фолликулярно-стромальное соотношение.

Для определения объемных образований яичника зачастую достаточно применения трансабдоминальной эхографии, в то время как для более подробного исследования структуры яичников (определения степени выраженности фолликулярного аппарата, соотношения стромы и фолликулов, толщины капсулы) предпочтительно использование вагинального трансдьюсера.

Размеры и структура яичников подвержены изменениям в зависимости от возраста, фазы менструального цикла и гормонального гомеостаза женщины. В связи с этим, их эхографическое изображение является вариабельным.

У женщин детородного возраста нормальные яичники на эхограммах выявляются как образования овальной формы, имеющие среднюю эхогенность. В центре ткань яичника акустически однородна, а по периферии представлена несколькими (обычно от 5 до 15), анэхогенными структурами, которые представляют собой фолликулярный аппарат — созревающие (граафовы) или атрезирующиеся фолликулы. Именно фолликулярный аппарат является эхо-графическим маркером яичника.

В репродуктивном возрасте эхографические размеры яичников составляют в среднем 30 мм в длину, 25 мм — в ширину и 15 мм — в толщину. Однако в

Эндокринная гинекология

зависимости от фазы МЦ их размеры могут вырьировать в следующих пределах: от 25 до 40 мм — в длину, от 15 до 30 мм — в ширину и от 10 до 20 мм — в толщину.

Наибольшие размеры и, соответственно, объем яичников наблюдаются у женщин в возрастной группе от 30 до 49 лет. В норме объем яичника составляет 1/3 объема матки и не превышает 8 см3, причем в фолликулярной фазе он составляет 4-6 см3, после овуляции — в среднем 3 см3.

Эхография дает уникальную возможность проследить за физиологическими изменениями, протекающими в яичниках во время МЦ, а именно, за созреванием фолликула, овуляцией, возникновением, развитием и регрессом желтого тела.

Тем не менее, несмотря на ряд имеющихся эхографических признаков овуляции, точно предсказать момент ее наступления невозможно, так как все перечисленные признаки свидетельствуют лишь о том, что время овуляции приближается.

Прогностическими признаками овуляции являются:

• наличие доминантного фолликула диаметром более 17 мм;

• выявление в доминантном фолликуле яйценосного бугорка;

• двойной контур вокруг доминантного фолликула;

• фрагментарное утолщение, неровность внутреннего контура доминант ного фолликула.

Эхографически овуляция сопровождается либо полным исчезновением доминантного фолликула, либо уменьшением его размера с деформацией структуры стенок и резким изменением внутреннего содержимого — оно превращается из анэхогенного в структуру средней эхогенности. Достаточно характерным признаком овуляции является появление жидкости в дугласовом пространстве.

Если беременность не наступает, возможны несколько вариантов дальнейшего развития желтого тела:

• регресс в белое тело

• увеличение в размерах, обычно до 30 мм, и персистенция в течение 4-8 недель в виде кистозного желтого тела (данный вариант рассматривается как физиологический);

• формирование кисты желтого тела.

Два последних варианта (рис. 2) требуют динамического наблюдения в течение 2-3 последующих МЦ.

К сказанному следует добавить, что желтое тело может существенно увеличить размер яичника, изменить его эхоструктуру и кровоток вплоть до имитации эктопической беременности, опухоли или другой патологии. В таких случаях лишь точное знание анамнеза и повторное исследование в первой фазе МЦ помогают избежать диагностических ошибок.

В постменопаузе в связи с угасанием репродуктивной функции размеры яичников уменьшаются. Наряду с этим происходят выраженные морфологические

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 55

Рисунок 2. Желтое тело яичника: а) формирующееся желтое тело; б) киста желтого тела

изменения в фолликулярном аппарате, поэтому обнаружение яичников существенно затрудняется.

При трансабдоминальном исследовании примерно на 30-50% снижается возможность визуализации постменопаузальных яичников. Использование трансвагинального датчика позволяет визуализировать яичники в 80-90% случаев. Если же это исследование проводить при частично наполненном мочевом пузыре, то точность выявления возрастает до 93,5%.

Актуальность вопроса о частоте выявления яичников при ультразвуковом исследовании определяется тем, что у женщин старше 40 лет возрастает частота возникновения рака яичников, а раннее выявление рака непосредственно связано с самой возможностью обнаружения яичников.

По мере увеличения продолжительности постменопаузы размеры яичников уменьшаются. Так, к концу первого года аменореи объем яичника составляет около 4,5 см3, после 5 лет менопаузы — около 2,5 см1, свыше 10 лет —

56 Эндокринная гинекология

около 1,5 см3. Следует подчеркнуть, что выявление у женщин в постменопаузе яичников объемом более 5 см3 является признаком патологии. Разница в объеме правого и левого яичников не должна превышать 1,5 см3. Во время исследования следует обращать внимание на асимметричное увеличение одного из яичников более чем в 2 раза, так как, по мнению N. Campbell (1991), у женщин в постменопаузе это является одним из признаков малигнизации.

В связи с постепенным угасанием гормональной функции яичников наличие единичных мелких фолликулов в течение первых 5 лет постменопаузы не должно расцениваться как патологический процесс. После 5 лет постменопаузы фолликулы не выявляются, а их персистенция должна вызывать определенную настороженность.

Вычисление яичниково-маточного коэффициента (ЯМК) в постменопаузе позволяет определять особенности инволютивных изменений внутренних половых органов и диагностировать патологические процессы. По нашим данным в норме у женщин в пременопаузе ЯМК составляет 0,13±0,05, в постменопаузе до 2 лет — 0,2±0,01 и после 5 лет менопаузы — 0,24±0,03 (табл. 7).

Таблица 7

Яичниково-маточный коэффициент у женщин в разные фазы климактерического периода (М±т)

При подозрении на внутриматочную патологию ультразвуковое исследование проводят накануне и сразу после окончания менструации, а при патологических выделениях из матки — независимо от дня менструального цикла.

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 57

При подозрении на полипоз эндометрия, с целью дифференциальной диагностики с фибромиомой подслизистой локализации рекомендуется применение гидроэхографии (рис. 3). Этот метод также информативен при очаговых изменениях в атрофичном эндометрии, так как позволяет визуализировать рельеф полости матки.

Ультразвуковая эхография является не только одним из основных методов диагностики патологии репродуктивной системы, но и незаменима для проведения мониторинга и определения эффективности проводимой терапии.

Рисунок 3. Полип эндометрия (эхограмма после введения контраста в полость матки)

Выявление на скрининге утолщение эндометрия более 15-16 мм, ЭМК > 0,3 в репродуктивном возрасте и более 5 мм, ЭМК > 0,15 в постменопаузе, а также изменение его структуры и звукопроводимости являются ультразвуковыми признаками бессимптомной патологии эндометрия и наряду с кровянистыми выделениями из матки у женщин разных возрастных групп являются показанием для применения инвазивных методов исследования эндометрия.

Гистологическое исследование эндометрия.

Наиболее достоверным является гистологический метод исследования эндометрия, ибо морфофункциональное состояние эндометрия определяется действием стероидных гормонов, в частности, эстрогены вызывают пролиферацию, а прогестерон — его секреторные преобразования.

Поскольку эндометрий является наиболее специализированной тканью с особой, биологически обусловленной чувствительностью к стероидным гормонам, то исследование его чрезвычайно важно для оценки эндокринного статуса женщины.

Гистологическое исследование эндометрия, как и других патологически измененных тканей при гинекологических заболеваниях, возможно только при умелом взятии материала для исследования, с учетом особенностей менструального цикла и клинической картины заболевания.

58 Эндокринная гинекология

При полном диагностическом выскабливании матки необходимо проводить соскобы раздельно: сначала — цервикального канала, а затем — полости матки, и материал фиксировать в двух различных емкостях. , Соскоб лучше всего собирать на чашку Петри, дно которой увлажнено физиологическим раствором, а затем фиксировать в 10% формалине.

При кровотечении, особенно в климактерическом периоде или менопаузе, желательно иметь для исследования соскоб из трубных углов матки, так как именно там чаще локализуются полипозные разрастания эндометрия, которые имеют высокий риск малигнизации. Несмотря на обилие соскоба, он должен быть отправлен на исследование весь.

Хорошо зарекомендовал себя также метод аспирационной биопсии эндометрия с применением пипелей, как менее травматичный и позволяющий получать для гистологического исследования минимально поврежденный эндометрий. Однако, учитывая несколько меньшую диагностическую ценность этого метода по сравнению с раздельным кюретажем матки, он реже используется в скрининговых программах, а чаще для мониторинга состояния эндометрия на фоне гормональной терапии.

При необходимости изучения влияния на эндометрий гормонов яичников, в том числе при выяснении причин бесплодия у женщин, или для контроля результатов гормонотерапии берутся также штриховые соскобы, или цуги. Необходимо, чтобы в полоску штрихового соскоба попала слизистая сверху донизу. Для исследования достаточно иметь 1-2 полоски эндометрия. При маточных кровотечениях эндометрий должен быть взят с поверхности всех стенок матки.

Для формирования правильного гистологического заключения патологоанатом должен быть обязательно информирован о времени выскабливания. Соскоб берется на 5-10-й либо на 21-25-й день (при 28-дневном менструальном цикле), т.е. перед месячными, при подозрении на недостаточность функции желтого тела или ановуляцию. При маточном кровотечении целесообразно проводить выскабливание в самом начале кровотечения, когда эндометрий практически полностью сохранен, или, если это не было сделано, то обязательно указывать в направлении на гистологическое исследование длительность кровотечения. При аменорее (если исключена беременность) показаны повторные штриховые соскобы на протяжении 3-4 недель с промежутками через 1 неделю.

Для оценки функционального состояния эндокринного статуса женщин необходимо учитывать морфологические критерии (параметры), позволяющие установить функцию эндометрия в динамике менструального цикла, т.е. в фолликулиновой (табл. 8) и лютеиновой (табл. 9) фазах. К ним относятся, митозы эпителия желез эндометрия и стромы, вакуолизация эпителия желез эндометрия, секреция желез эндометрия, диаметр просвета железы эндометрия, псевдостратификация и особенность эпителия желез эндометрия, наличие клубочков спиралевидных артерий, предецидуальная реакция, отек стромы эндометрия, наличие апоптозных телец, лимфоцитов, нейтрофилов.

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 59

Таблица 8 Морфологические особенности эндометрия в пролиферативной фазе

Таблица 9 Морфологические особенности эндометрия в лютеиновой фазе

При этом в фолликулиновой фазе важно учитывать динамику таких критериев, как митозы эпителия желез и стромальных клеток, псевдостратификация эпителия желез, отек стромы, обусловленные эстрогенным влиянием.

Для оценки полноценности лютеиновой фазы важную роль играют изменения и рост желез, наличие секреции желез эндометрия; рост клубочков спиралевидных артерий, предецидуальная реакция стромы эндометрия, появление апоптозных телец, которые учитываются ранговым методом по балльной системе от 0 до 3-х, где 0 — нет изменений, 1 — начальные изменения, 2 — изменения, захватывающие до 50% ткани эндометрия, 3 — > 50% ткани эндометрия (см. табл. 9).

60 Эндокринная гинекология

Циклические изменения, вызываемые половыми гормонами яичников, наиболее выражены в функциональном слое эндометрия. Базальный же слой эндометрия существенных изменений в цикле не претерпевает и в норме не отторгается во время менструации: в базальном слое локализуются стволовые клетки, которые обеспечивают регенерацию эпителиальных структур эндометрия после каждого менструального кровотечения.

Циклические превращения функционального слоя эндометрия протекают соответственно яичниковому циклу в несколько последовательных стадий (рис. 4).

Примечание: Р — ранняя, С — средняя, П — поздняя.

Рисунок 4. Гистологические изменения в зависимости от фазы меструального цикла

(SopelakV., 1997)

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 61

Как известно, различают I фазу — фазу пролиферации (ранняя стадия — 5-7-й день, средняя — 8-10-й день, поздняя —10-14-й день) и II фазу, фазу секреции (ранняя —15-18-й день, первые признаки секреторных превращений; средняя — 19-23-й день, наиболее выраженная секреция; поздняя — 24-26-й день, начинающийся регресс, регресс с ишемией — 26-27-й день), III фазу, фазу кровотечения или менструации (десквамация — 28-2-й день и регенерация — 3-4-й день).

В норме фаза пролиферации продолжается 14 дней. Возникающие в эту фазу изменения в эндометрии обусловлены действием нарастающего количества эстрогенов, секретируемых растущим и созревающим фолликулом (Хмельницкий O.K., 2000).

В ранней стадии фазы пролиферации (5-7-й день цикла) эндометрий тонкий, деление функционального слоя на зоны отсутствует, поверхность его выстлана уплощенным цилиндрическим эпителием, имеющим кубическую форму. Железистые крипты в виде прямых или слегка извитых трубочек с узким просветом, на поперечных срезах имеют круглую или овальную форму. Эпителий железистых крипт призматический, ядра овальные, расположены у основания, хорошо окрашиваются, апикальный край эпителиальных клеток в световом микроскопе представляется ровным, четко очерченным.

В средней стадии фазы пролиферации нарастает активность щелочной фосфатазы в эндометрии. В строме отмечаются явления отека, разрыхления. Цитоплазма стромальных клеток становится более различима, ядра их выявляются довольно отчетливо, по сравнению с ранней стадией нарастает число митозов. Сосуды стромы по-прежнему единичны, с тонкими стенками.

В поздней стадии фазы пролиферации (11-14-й день цикла) отмечается некоторое утолщение функционального слоя, однако деление на зоны еще отсутствует. Поверхность эндометрия выстлана высоким цилиндрическим эпителием. Железистые структуры приобретают более извитую, штопорообраз-ную форму, более тесно прилежат друг к другу, чем в предыдущих стадиях. Эпителий железистых крипт — высокий цилиндрический. Апикальные края его представляются при световой микроскопии ровными, четкими. При электронной же микроскопии обнаруживаются микроворсинки, представляющие собой плотные цитоплазматические отростки, покрытые плазматической мембраной. Увеличиваясь в размерах, они создают дополнительную площадь для распределения ферментов. Как раз в эту стадию активность щелочной фосфатазы достигает своего максимума (Топчиева О.И. и соавт., 1978).

В конце фазы пролиферации при светооптическом исследовании обнаруживаются мелкие субнуклеарные вакуоли, в которых определяются мелкие гранулы гликогена. Гликоген в этой стадии образуется в связи с предовуля-торной секрецией гестагенов в достигшем зрелости фолликуле. Спиральные артерии стромы, которые подрастают из базального слоя в среднюю стадию фазы пролиферации, еще не сильно извиты, поэтому в гистологических срезах обнаруживаются лишь один-два перерезанных поперек сосуда с тонкими стенками (Топчиева О.И. и соавт., 1978; Железнов Б.И., 1979).

62 Эндокринная гинекология

Таким образом, эстрогены одновременно с пролиферацией клеток эпителия стимулируют в течение фазы пролиферации развитие секреторного аппарата клетки, подготавливая его для дальнейшей полноценной функции в фазе секреции. Этим и объясняется последовательность событий, имеющая глубокий биологический смысл. Вот почему без предварительного воздействия эстрогенов на эндометрий прогестерон практически не действует. На сегодня выявлено, что рецепторы прогестерона, обеспечивающие чувствительность к этому гормону, активируются предшествующим действием эстрогенов.

Как представляет O.K. Хмельницкий (2000), фаза секреции, непосредственно связанная с гормональной активностью желтого тела и соответствующей секрецией прогестерона, длится 14 дней. Укорочение или удлинение фазы секреции более чем на два дня у женщин, находящихся в репродуктивном возрасте, следует рассматривать как патологическое состояние, поскольку такие циклы, как правило, оказываются ановуляторными. Колебания секреторной фазы от 9 до 16 дней могут иметь место в начале или в конце репродуктивного периода, т.е. при становлении или угасании маточно-овариального цикла.

В диагностике 1-ой недели секреторной фазы особое значение приобретают изменения в эпителии, позволяющие говорить о произошедшей овуляции. Характерные изменения 1-ой недели в эпителии связаны с нарастающей функцией желтого тела.

На 2-ой неделе день прошедшей овуляции наиболее точно может быть определен по состоянию клеток стромы. Изменения 2-ой недели в строме связаны с наивысшей функцией желтого тела и наступающего затем его регресса и снижения концентрации прогестерона.

В раннюю стадию фазы секреции (на 15-18-й день цикла) толщина эндометрия заметно нарастает по сравнению с фазой пролиферации. Самым характерным признаком наступления фазы секреции — ее ранней стадии — является появление в эпителии желез субнуклеарных вакуолей. При обычном све-тооптическом исследовании проявление секреции в виде субнуклеарных вакуолей наблюдается обычно на 16-й день цикла, что свидетельствует о свершившейся овуляции и выраженной гормональной функции менструального желтого тела. К 17-му дню цикла (3-й день после овуляции) гранулы гликогена содержатся в большинстве желез и располагаются на одном уровне в ба-зальных отделах клеток под ядром. В результате этого и ядра, находящиеся над вакуолями, также располагаются в ряд, на одном уровне. Затем на 18-й день (4-й день после овуляции) гранулы гликогена перемещаются в апикальные отделы клеток, как бы обходя ядро. В результате этого ядра вновь словно опускаются вниз к основанию клетки. Нередко к этому сроку ядра в различных клетках оказываются на разных уровнях. Изменяется и их форма — они становятся более округлыми, митозы исчезают. Цитоплазма клеток становится базофильной, в апикальной части их выявляются кислые мукополи-сахариды.

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 63

Наличие субнуклеарных вакуолей является признаком свершившейся овуляции. Однако надо помнить, что они отчетливо выявляются при световой микроскопии спустя 36-48 часов после овуляции. Следует учитывать, что суб-нуклеарные вакуоли могут наблюдаться и при других ситуациях, характеризующихся действием прогестерона. При этом, однако, они не будут выявляться однотипно во всех железах, и форма и величина их будут различны. Так, нередко субнуклеарные вакуоли обнаруживаются в отдельных железах в ткани "смешанного" гипопластического и гиперпластического эндометрия.

Наряду с субнуклеарной вакуолизацией для ранней стадии фазы секреции характерно изменение конфигурации железистых крипт: они извилисты, расширены, однотипны и правильно расположены в рыхлой, несколько отечной строме, что свидетельствует о действии прогестерона на стромальные элементы. Спиральные артерии в раннюю стадию фазы секреции приобретают более извитой вид, однако "клубков", характерных для последующих стадий секреции, еще не наблюдается.

В средней стадии фазы секреции (19-23-й день цикла) в эндометрии отмечаются наиболее выраженные секреторные превращения, которые происходят в результате наивысшей концентрации гормонов желтого тела. Функциональный слой при этом утолщен. В нем отчетливо прослеживается подразделение на спонгиозный (губчатый) или глубокий и компактный или поверхностный слои. В компактном слое железистые крипты менее извиты, преобладают клетки стромы, эпителий, выстилающий поверхность компактного слоя, высокий призматический, не секретирующий. Железистые крипты штопоро-образной формы довольно тесно прилежат друг к другу, просветы их все более расширяются, особенно к 21-22-му дню цикла (то есть к 7-8-му дню после овуляции) и становятся более складчатыми. Процесс выделения гликогена путем апокриновой секреции в просвет желез заканчивается к 22-му дню цикла (8-й день после овуляции), что приводит к образованию больших, растянутых желез, заполненных хорошо различимыми при окраске на гликоген мелкодисперсными гранулами.

В строме в среднюю стадию фазы секреции возникает децидуальноподоб-ная реакция, отмечаемая главным образом вокруг сосудов. Затем децидуаль-ная реакция из островкового типа приобретает диффузный характер, в особенности в поверхностных отделах компактного слоя. Соединительнотканные клетки становятся крупными, округлой или полигональной формы, напоминают вид торцовой мостовой, на 8-й день после овуляции в них обнаруживается гликоген.

Самым точным индикатором средней стадии фазы секреции, свидетельствующим о высокой концентрации прогестерона, являются изменения спиральных артерий, которые в среднюю стадию секреции резко извиты и образуют "клубки". Они обнаруживаются не только в спонгиозном, но и в самых поверхностных отделах компактного слоя, поскольку с 9-го дня после овуляции отек стромы уменьшается, то к 23-му дню цикла клубки спиральных ар-

64 Эндокринная гинекология

терий уже выражены наиболее четко. Наличие развитых спиральных сосудов в функциональном слое эндометрия считается одним из наиболее достоверных признаков, определяющих полноценное прогестероновое воздействие. Слабое же развитие "клубков" спиральных сосудов в эндометрии секреторной фазы расценивается как проявление недостаточности функции желтого тела и недостаточной подготовленности эндометрия к имплантации.

Как указывают О.И. Топчиева и соавт. (1978), структура эндометрия секреторной фазы средней стадии на 22-23-й день цикла может наблюдаться при длительной и повышенной гормональной функции менструального желтого тела, т.е. при персистенции желтого тела (в подобных случаях бывает особенно сильно выражена сочность и децидуальноподобное превращение стромы, а также секреторная функция желез), или в ранние сроки беременности в течение первых дней после имплантации — при маточной беременности за пределами зоны имплантации; а также равномерно во всех участках слизистой оболочки тела матки при прогрессирующей внематочной беременности.

Поздняя стадия фазы секреции (24-27-й день цикла) наступает в том случае, если оплодотворение яйцеклетки не произошло и беременность не наступила. В этом случае на 24-й день цикла (10-й день после овуляции) трофика эндометрия в связи с началом регресса желтого тела и, соответственно, снижением концентрации прогестерона нарушается, и в нем развивается целый ряд дистрофических процессов, т.е. в эндометрии возникают изменения регрессивного характера.

При обычной светооптической микроскопии за 3-4 дня до ожидаемой менструации (на 24-25-й день цикла) отмечается уменьшение сочности эндометрия вследствие потери им жидкости, наблюдается сморщивание стромы функционального слоя. Железы вследствие сморщивания стромы эндометрия становятся еще более складчатыми, тесно располагаются друг к другу и приобретают на продольных срезах пилообразные, а на поперечных — звездчатые очертания. Наряду с железами, в которых секреторная функция уже прекратилась, всегда имеется некоторое количество желез со структурой, соответствующей более ранним стадиям секреторной фазы. Эпителий железистых крипт характеризуется неравномерной окраской ядер, часть из которых пик-нотична, в цитоплазме появляются мелкие капли липидов.

В этот период в строме предецидуальные клетки сближаются друг с другом и выявляются не только в виде островков вокруг клубков спиральных сосудов, но и диффузно по всему компактному слою. Среди предецидуальных клеток обнаруживаются мелкие клетки с темными ядрами — эндометриаль-ные зернистые клетки, которые, как показали электронно-микроскопические исследования, трансформируются из соединительнотканных клеток, т.е. более крупных предецидуальных клеток, которые располагаются преимущественно в компактном слое. При этом отмечается обеднение клеток гликогеном, ядра их становятся пикнотичными.

На 26-27-й день цикла в строме можно обнаружить расширение капилляров

Глава 2. Методы диагностики функционального состояния репродуктивной системы 65

зговые кровоизлияния в поверхностных слоях. Это связано с тем, что по

е развития цикла спиральные артериолы удлиняются быстрее, чем увеличивается толщина эндометрия, так что сосуды приспосабливаются к эндометрию за счет повышения извилистости. В предменструальный период спирали-зация становится такой выраженной, что замедляет кровоток и вызывает стаз и тромбоз. Этот момент, наряду с рядом других биохимических процессов, объясняет эндометриальный некроз и дистрофические изменения кровеносных сосудов, которые приводят к менструальному кровотечению. Незадолго до начала менструации расширение сосудов сменяется спазмом, который объясняют действием различных типов токсических продуктов распада белка или других биологически активных веществ на фоне падения уровня прогестерона.

Фаза кровотечения, менструация (28-4-й день цикла), характеризуется сочетанием процессов десквамации и регенерации.

Чрезвычайно важным в отношении тактики ведения пациенток является отмечаемое гистологически наличие лейкоцитарной инфильтрации в сочетании с другими признаками воспалительного процесса, который достаточно часто остается незамеченным клиницистом. Именно нелеченный воспалительный процесс, особенно неспецифической этиологии, является частой причиной нечувствительности гиперплазированного эндометрия к гестагенам.

Таким образом, как видно из представленных данных, гистологическое исследование эндометрия необходимо для оценки эндокринного статуса женщины, и изменения в эндометрии необходимо учитывать для адекватного определения механизмов развития той или иной патологии в репродуктивной системе.

Мы не ставили своей задачей подробное описание изменений эндометрия на фоне тех или иных изменений содержания половых стероидных гормонов. Однако следует отметить, что хотя гистолог, оценивая имеющуюся морфологическую картину в сопоставлении с представленными ему в направлении данными клиники и анамнеза, формирует заключение, интерпретация выявленных гистологом морфологических особенностей эндометрия — это все-таки задача гинеколога. Хочется только лишний раз обратить внимание на чрезвычайную важность адекватной оценки состояния эндометрия для определения гормонального гомеостаза и последующего выбора методов его коррекции и недопустимости трактовки результатов гистологического исследования как "хороших" или "плохих", имея в виду исключительно онкориск.

Литература

1. Ефимов А.С, Боднар П.Н., Зелинский Б.А. Эндокринология. — К.: Вища школа, 1983. —327 с.

2. Клиническое руководство по ультразвуковой диагностике / Под ред. В.В. Мить-кова, М.В. Медведева). — М.: Видар, 1997. — 318 с.

3. Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф., Меньшиков В.В. Биохимические исследования в клинике. — Элиста: АПП "Джангар", 1998. — 249 с.

66 Эндокринная гинекология

4. Стрижаков А.Н., Давыдов А.И. Клиническая трансвагинальная эхография. — М.: Медицина, 1999. — 278 с.

5. Татарчук Т.Ф., Бурлака Е.В., Сольский Я.П., Захаренко Н.Ф., Попова Т.А. Ранние ультразвуковые признаки гиперпластических процессов эндометрия у женщин в периоде климактерия // III наук.-практ. конф. "Злоякюш пухлини матки та тро-фобласту. Патогенез, диагностика та лисування". — К., 25-26 листопада, 1999. — С. 35-40.

6. Хмельницкий O.K. Патоморфологическая диагностика гинекологических заболеваний. — СПб.: СОТИС, 1994. — 480 с.

7. Al-Azzawi F, Wahab M. Hormone replacement therapy and the endometrium. New-York-London: The Parthenon Publishing Group, 2001: 172.

8. Sopelak V. Regulation of the ovarian menstrual cycle.- Clinical reproductive medicine / Cowan B.D., Seifer D.B.- Philadelphia-New York.: Lippincott-Raven Publishers.-1997.-P.61-68.

9. Leidenberger FA, Weise HCh, Breustedt HJ, Schulte HM. Anabasis. Stand: November, 1995: 284.

10. Yen SSC, et al. Reproductive Endocrinology Physiology, Pathophysiology, and Clinical Management, Philadelphia-Tokyo: W.B. SAUNDERS COM PANY 1999.